1. Vaha -upotus
Läpinäkyvä kudos on vahattava läpinäkyvän aineen (kuten ksyleenin) korvaamiseksi parafiinivahalla, jotta parafiinivaha voi tunkeutua kudokseen ja antaa tukea seuraavaa viipalointia.
Käyttövaiheet: Aseta läpinäkyvä kudos sulatettuun parafiinivahaan, yleensä noin 60 asteessa, varmistaaksesi, että parafiinivaha voi tunkeutua kokonaan kudokseen.
Huomautuksia: Vahan upotusaika on säädettävä kudoksen koon ja tyypin mukaan yleensä 1-2 tunteja.
2. viipalointi
Vaha-kytketty kudos on viipalottava myöhempää värjäystä ja havaintoja varten.
Käyttövaiheet: Leikkaa kudoksen viipaloija ohuiksi viipaleiksi, yleensä 4-6 mikronit paksu.
Huomautuksia: Varmista, että terä on terävä, kun viipaloivat kudoksen repimisen tai muodonmuutoksen välttämiseksi.
3. Värjäys
Viipaloinnin jälkeen värjäys tarvitaan kudoksen eri osien valmistukseen. Erilaisia värejä on helppoa mikroskooppista havaintoa.
Käyttövaiheet: Aseta viipaleet värjäysliuokseen. Yleisiä värjäysmenetelmiä ovat hematoksyliini-eosiinivärjäys (H&E -värjäys).
Huomautuksia: Värjäysaika on säädettävä värjäysmenetelmän ja kudostyypin mukaan, jotta värjäys välttäisi liian tummaa tai liian kevyttä.
4. Tiivistys
Värjäytymisen jälkeen viipaleet on suljettava viipaleiden suojaamiseksi ja mikroskooppisen havainnon helpottamiseksi.
Käyttövaiheet: Kiinnitä viipaleet liukun viipaleihin ja peitä ne sitten kansiliikkeillä.
Huomautuksia: Vältä kuplien muodostumista tiivistettäessä ja varmista, että tiivistysliuos kattaa viipaleet tasaisesti.
5. kuvantaminen ja havainto
Tiivistelmän jälkeen viipaleet voidaan kuvata ja havaita mikroskoopilla.
Käyttövaiheet: Aseta suljetut viipaleet mikroskoopin alle, säädä tarkennus ja kirkkaus ja tarkkaile ja ota kuvia.
Huomautuksia: Kiinnitä havaintoprosessin aikana mikroskoopin suurennuksen ja aukon säätämiseen parhaan havaintovaikutuksen saamiseksi.
